Disciplina Imunologie si Imunologia Transplantului - Institutul Clinic Fundeni

Prof. Univ. Constantinescu Ileana titular
Sef Lucrari Moise Ana titular

Centrul de Imunogenetica si Virusologie Fundeni, locul in care disciplina isi desfasoara activitatea, este primul centru de biologie moleculara in imunologia transplantului din Romania, fiind acreditat de Federatia Europeana de Imunogenetica (EFI) din anul 2006.

Incepand cu anul 2006, laboratorul este Centrul de Referinta in Imunologia Transplantului in Romania, forum metodologic, organizand periodic Workshop-uri internationale, mese rotunde si cursuri in domeniul histocompatibilitatii, imunogeneticii si virusologiei, congrese si alte manifestari stiintifice nationale si internationale.

Activitatea principala a Centrului de Imunogenetica si Virusologie consta in efectuarea tuturor investigatiilor imunologice si virusologice in vederea performarii procedurii de transplant, fie de organ solid (rinichi, inima, ficat,etc.), fie de celule stem hematopoietice.

Aceste investigatii sunt efectuate atat primitorilor unui transplant cat si donatorilor (vii sau in moarte cerebrala) si includ: diagnostic virusologic indirect (screening serologic) si diagnostic direct (determinarea incarcaturii virale) pentru virusurile hepatitice (VHC, VHB),  HIV ½ , herpesvirusuri (EBV, CMV, HSV ½ ), parvovirus B19, BK polyomavirus, adenovirusuri, HTLV ½ , toxoplasma gondii ; markeri tumorali; screening si identificare de anticorpi citotoxici; genotiparea HLA si stabilirea compatibilitatii primitor-donator; test crossmatch; Chimerism;

Totodata, Centrul de Imunogenetica si Virusologie asigura investigatiile necesare monitorizarii primitorilor in perioada posttransplant: evaluarea infectiilor virale si a marker-ilor tumorali in contextul tratamentului imunosupresor; imunologie de rejet (anticorpi anti-HLA); dozarea nivelelor sanguine ale imunosupresoarelor (tacrolimus, sirolimus, ciclosporina);

Pentru celelalte sectii ale Institutului Clinic Fundeni, care nu desfasoara activitate de transplant, laboratorul efectueaza teste de diagnostic immunologic si virusologic direct si indirect, imunologie tumorala, genotipari HLA specifice, asociate cu anumite boli. De asemenea, Centrul de Imunogenetica este implicat in activitatea de coordonare, recrutare, donare si testare virusologica si imunologica pentru Registrul National de Donatori Voluntari de Celule Stem Hematopoietice.

Centrul de Imunogenetica si Virusologie este Centru de Invatamant si Educatie Medicala in domeniul Imunologiei si Imunologiei de transplant pentru toate centrele de Imunologie din tara: Iasi, Targu Mures, Timisoara si Cluj.

Scopul propus este stabilirea procedurilor de operare standard (SOP) in genetica moleculara a HLA, uniformizarea metodelor de lucru in ceea ce priveste genotiparea HLA, testele de screening si identificare a anticorpilor citotoxici din serul primitorilor si testul crossmatch.

De asemeni ne-am propus uniformizarea algoritmurilor de lucru in domeniul Virusologiei Moleculare si monitorizarii terapiei Imunosupresoare (Ciclosprina, Tacrolimus, Sirolimus) posttransplant.

Directii de cercetare

  • Noutati in diagnosticul si tratamentul bolilor autoimmune si impactul bolilor autoimmune asupra transplantului de organ solid.
  • Imunobiologia transplantului de organ solid (rinichi, ficat, cord).
  • Diagnosticul genetic molecular, imunologic si impactul asupra evolutiei posttransplant medular.
  • Crossmatch-ul virtual, aspecte clinice, imunogenetice si de prognostic in transplantul renal.
  • Biologia Moleculara a rejetului acut sub-clinic si clinic in transplantul de organ solid.
  • Biologia Moleculara a GVHD post transplant de celule hematopoietice periferice.
  • Rolul imunogeneticii tumorale in diagnosticul si monitorizarea diferitelor tipuri de cancer posttransplant.
  • Oncogene si expresia alelelor HLA in diferite tipuri de cancer (cancer renal, de vezica urinara si de prostata). Eficienta stimularii imunitatii celulare in diferite tipuri de cancer.
  • HLA si prognosticul in oncologie (cancer urologic).
  • Imunoterapia in cancerul de vezica urinara.
  • Poate fi aparitia neoplaziilor posttransplant renal, prevenita ?
  • Care este rolul diagnosticului molecular in prevenirea aparitiilor neoplaziilor posttransplant renal ?
  • Farmacogenetica aplicata in predictia raspunsului la tratamentul imunosupresor post transplant.
  • Diagnosticul genetic molecular in cancerul renal, de prostate si de vezica.
  • Locul si rolul vaccinoterapiei in cancer.
  • Cum influenteaza anticorpii anti-HLA selectia donator-receptor in transplantul renal si care este impactul lor asupra evolutiei posttransplant renal ?

Cursul de Imunologie anul III (modul limba romana si limba engleza)

Tematica

  • Definirea aspectelor generale ale răspunsului imun
  • Originea, destinația și structura celulelor și țesuturilor sistemului imunitar
  • Antigenul
  • Anticorpul
  • Dezvoltarea celulelor B
  • Dezvoltarea celulelor T
  • Structura si rolul complexului imun de histocompatibilitate (MHC)
  • Magia prelucrarii și prezentarii antigenului
  • Receptori de celule T: structura și funcții în activarea celulelor T
  • Imunitatea umorală
  • Inflamatia
  • Hipersensibilitatea imediată
  • Hipersensibilitatea întârziată  (DTH)
  • Liza mediată de complement versus liza mediată cellular
  • Imunitate microbiana si imunoparazitologie
  • Autoimunitatea
  • Transplantul
  • Imunopatologia: sistemul imun raspunde gresit
  • Imunodeficiențele  secundare
  • Bolile alergice
  • Bolile tesutului conjunctiv
  • Sindromul vasculitic
  • Boli cu determinism mixt
  • Psiho-neuro-imunologie și neuro-endocrino-imunologie
  • Cancerul si sistemul imunitar
  • Imunochimie
  • Investigații celulare
  • Problemele de calitate și de management

Bibliografie

  1. Imunologia transplantului, Ileana Constantinescu, ISBN: 978-973-708-431-6, 2009
  2. Basic concepts in immunology, John Clancy, JR, ISBN 0-07-011371-8, 1998
  3. Immunology-Problem based, Reginald M. Gorczynski, Jacqline Stanley, ISBN: 9781416024163 25.99, 2006
  4. How the immune system works, third edition, Lauren Sompayrac, ISBN: 978-1-4051-6221-, 2008
  5. Immunology, Stephen Boag & Amy Sadler, ISBN: 978-0-340-92558-4, 2007
  6. Oxford handbook of clinical immunology, Gavin Spickett, ISBN: 0-19-262721-x, 1999
  7. Roitt’s Essential Immunology, Peter J., Delves I., Seamus J., Martin Dennis R., Burton Ivan M. Roitt, 12th edition, 2011.
  8. Human Leucocyte antigen: The major Histocompatibility Complex of Man, Clinical Diagnosis and management by Laboratory Methods, J. Bernard Henry, M.D., twentieth ed., 2001.
  9. Genetics and molecular genetics of the MHC, reviews in Immunogenetics, Rhodes, D.A., Trowsdale, J., 1999.
  10. HLA Beyond tears. De novo, Rodey Glenn E., 2000
  11. Molecular Diagnostics a training and study guide, Tsongalis Gregory J, Coleman William B., 2002.
  12. Transplantul renal, Sinescu I., Manu M.A., harza M., 2007.
  13. Oncogeneza virala-aspecte de etio-patogeneza, Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petru Adrian Mutiu in colaborare cu Vasile Nastase si Andrei Antoniu Dinu, cap.8 Virusuri cu potential oncogen pentru om, pag.363-449, editura Academiei Romane, 2015, ISBN 978-973-27-2512-2
  14. Tratat de Urologie, I.Sinescu, Editura Universitară „Carol Davila”, Bucureşti, 2011, ISBN: 978-973-708-558-0

Lucrari practice curs Imunologie an III

  1. Investigatii celulare – detectia produselor celulare specifice
  2. Tehnica de lucru EIA
  3. Tehnica de lucru ELISA
  4. Electroforeza proteinelor serice
  5. Imunograma
  6. Culturi de celule
  7. Analiza proliferarii celulare
  8. Teste de apostoza
  9. Markeri de adeziune
  10. Flow citometrie – importanta in diagnosticul immunologic al diferitelor afectiuni
  11. Celulele NK
  12. Receptorii Toll like
  13. Tehnici de imunogenetica moleculara – tehnici PCR (HLA, Chimerism, viremii)
  14. Extractia de ADN
  15. Extractia de ARN
  1. Genotiparea HLA in transplant
  2. Complexul major de histocompatibilitate
  3. Imunobiologia transplantului renal
  4. Imunobiologia transplantului de celule stem hematopoetice.
  5. Registrul National de Donatori Onorifici de Celule Stem Hematopoetice.
  6. Imunologia transplantului de cord
  7. Determinarea polimorfismului genelor KIR prin SSP
  8. Dozarea cantitativa a IL2R in ser (chemiluminescenta amplificata enzimatic)
  9. Determinarea polimorfismului genelor citokinelor prin SSP
  10. Dozarea cantitativa a neopterinului seric (ELISA cantitativa): interpretare in contextul clinic

Curs optional Imunologia transplantului, anul IV (modul limba romana si limba engleza)

Programa analitica curs

  1. Imunogenetica si transplantul: baza genetica a transplantului, notiuni introductive, elemente de baza ale geneticii ( ADN, gene si cromozomi,locusuri, alele si fenomenul de segregare)
  2. Complexul major de histocompatibilitate; structura MHC, genele sistemului HLA de clasa I si de clasa II. Nomenclatura HLA. Fenomenul de „linkage disequilibrium”. Variatii etnice
  3. Moleculele HLA de clasa I: structura, organizare, functie. Reglarea expresiei genelor de clasa I. Alte gene de clasa I
  4. Moleculele HLA de clasa a II-a: structura, organizare, functie. Reglarea expresiei genelor de clasa a II-a. Alte gene de clasa a II-a.
  5. Antigenele minore de histocompatibilitate. Genele raspunsului imun (genele KIR). Polimorfismul genelor citokinelor si implicatia lor in transplant
  6. Evaluarea raspunsului imun umoral si celular in transplant
  7. Genotiparea si potrivirea HLA donator – receptor in diferite tipuri de transplant.
  8. Baza imunologica a fenomenului de rejet acut si cronic in diferite tipuri de transplant. Prevenirea fenomenului de rejet acut si cronic in transplantul de organe solide si celule
  9. Imunologia transplantului renal si de pancreas – rinichi
  10. Imunologia transplantului hepatic
  11. Imunologia transplantului de celule stem hematopoetice
  12. Imunologia transplantului de cord
  13. Imunologia transplantului de mana, piele, cornee
  14. Protocoalele de evaluare imunologica acreditate EFI (European Federation for Immunogenetics) pretransplant de organe solide si celule.
  15. Problemele imunologice complexe legate de infectiile virale, bacteriene, fungice si parazitologice la populatia tranplantata.
  16. Monitorizarea imunologica posttransplant de organe solide si cellule stem
  17. Monitorizarea virusologica posttransplant de organe solide si cellule
  18. Managementul listelor de asteptare.
  19. Managementul Centrelor de Imunogenetica si Virusologie: standardizarea metodelor, asigurarea calitatii
  20. Registrul national de donatori onorifici de celule stem hematopoetice

Tematica LP curs optional Imunologia Transplantului anul IV

  1. Genotiparea HLA prin tehnica SSOP; interpretare in contextul transplantului respectiv
  2. Genotiparea HLA prin tehnica SSP; interpretare in contextul transplantului respectiv
  3. Testul crossmatch prin CDC: interpretare in diferite tipuri de transplant
  4. Testul crossmatch prin ELISA: interpretare
  5. Testul ELISA pentru detectia anticorpilor anti-HLA: interpretare si semnificatie clinica
  6. Testul ELISA pentru identificarea anticorpilor anti-HLA: interpretare si semnificatie clinica
  7. Determinarea anticorpilor citotoxici prin tehnica Luminex
  8. Electroforeza proteinelor serice
  9. Reactia de amplificare genica utilizata pentru detectia cantitativa a ARN-VHC: interpretare si semnificatie clinica in transplant
  10. Reactia PCR pentru detectia cantitativa a ADN-VHB
  11. Reactia PCR pentru herpesvirusuri: interpretare si semnificatie clinica
  12. Dozarea cantitativa a ciclosporinei in sangele total
  13. Dozarea cantitativa a tacrolimusului in sangele total
  14. Dozarea cantitativa a sirolimusului in sangele total
  15. Tehnica SBT in rezolvarea ambiguitatilor alelelor HLA

Pentru Disciplina Imunologie si Imunologie de Transplant propunem urmatoarele teme ale cursurilor de perfectionare care se pot desfasura la nivelul Disciplinei Imunologie si Imunologie de  Transplant din cadrul I.C. Fundeni:

Cursuri postuniversitare:

  1. Biologia Moleculara in Medicina de Laborator: avantaje, beneficii si problemele de interpretare.
  2. Actualitati in Imunologia
  3. Infectiile cu virusurile hepatitice VHB, VHD si VHC: aspecte specifice de diagnostic si tratament.
  4. Monitorizarea imunologica si virusologica postransplant renal.
  • imunologie
  • imunologie molecular
  • biologie molecular
  • virusologie moleculara
  • transplant
  • genetica moleculara
  • oncologie
  1. Project code: POSDRU 86/1.2/S/57748

Title: Strategic program to promote innovation in education services through open, continuous (INSEED)

Beneficiary: University Politehnica Bucharest

Partner: Carol Davila University

  1. Project code: 59497

Project title: Training and Organizational Immunology Laboratories employees by implementing advanced technologies and quality management – IMUNOLAB

Beneficiary: Romanian Society of Immunology

  1. Project code: POSDRU/89/1.5/S/64153

Project title: Support postdoctoral research in the field of reconstructive surgery transplant

Beneficiary: Carol Davila University

  1. Title: „Development of the National Strategy on Environmental Research, Technological Development and Innovation for 2014-2020”

Beneficiary: Executive Agency for Higher Education, Research, Development and Innovation

Contract Financing for Projects Sector Plan no. 6S / 20.12.2012, Health Panel

  1. Titlu: Specializare pentru performanta, eficacitate si raspuns in domeniul transplantului de organe – S.P.E.R.

Beneficiary: Project co-financed by the European Social Fund Operational Programme Human Resources

Development 2007-2013, Invest in the people, POSDRU 81 / 3.2 / S / 59 616

  1. Clinical and therapeutical importance of HBV genotyping in Romania, Constantinescu, I; Nedelcu, F; Toader, MA; Vasile, D, Journal of medicine and life, 2008 Apr-Jun, Vol.1, Issue 2
  2. Primary immunodeficiencies of the B lymphocyte, Moise, A; Nedelcu, F D; Toader, MA; Sora, SM; Tica, A; Ferastraoaru, DE; Constantinescu, I, Journal of medicine and life, 2010 Jan-Mar, Vol.3, Issue 1
  3. Cytotoxic antibodies–valuable prognostic factor for long term kidney allograft survival, Moise, A; Nedelcu, D; Toader, A; Sora, M; Tica, A; Ferastraoaru, DE; Constantinescu, I, Journal of medicine and life, 2010 Oct.-Dec., Vol.3, Issue 4
  4. Cytokine gene polymorphisms support diagnostic monitoring of Romanian multiple myeloma patients, Banu, C; Moise, A; Arion, C V; Coriu, D; Tanase, A; Constantinescu, I, Journal of medicine and life, 2011-Aug-15, vol. 4, Issue 3
  5. Quantification of Cyclosporine, Tacrolimus and Sirolimus Concentrations from Whole Blood of Bone Marrow and Renal Transplantated Patients – Benefits for Long Term Outcome and Survival, Constantinescu, I; Istrate, G., Revista de Chimie, 2013 Nov. ,Vol.64, Issue 11
  6. Cytotoxic antibodies screening in kidney transplantation: clinical relevance and challenges,Constantinescu Ileana, Moise A, Nedelcu D, Toader A, Petre D, I Sinescu,27nd Annual EFI European Immunogenetics and Histocompatibility Conference, Maastricht, Netherlands, 11-14 May 2013,Tissue Antigens – Immune response genetics, vol. 77, issue 5, pag.433-434; ISSN: 0001-2815 print,. Impact factor=2,753
  7. Quantification of Cyclosporine, Tacrolimus and Sirolimus, Concentration from Whole Blood in Bone Marrow and Renal Transplantation – articol– Ileana Constantinescu, Gabriela Istrate, Revista de Chimie, Bucuresti, noiembrie, 11, 2013, ISSN-0034-7752
  8. Hepatitis B Virus Core Promoter Mutations in Patients With Chronic Hepatitis B and Hepatocellular Carcinoma in Bucharest, Romania, Constantinescu, I; Dinu, AA; Boscaiu, V; Niculescu, M, Hepatitis Monthly, 2014 Oct., Vol.14, Issue 10
  9. Complex immunology issue in renal transplanted chronic HBV/HCV carriers,Nastase V, Dinu AA, Moise A, Nedelcu FD, Toader MA, Mircescu G, Sinescu I, Constantinescu Ileana,28nd EFI – European Immunogenetics and Histocompatibility Conference,25-28 May  2014, Stockholm, Sweden,Tissue Antigens, vol. 84, issue 1, pag.84-85. ISSN: 0001-2815, Impact factor=2,350
  10. The frequency of HLA alleles in the Romanian population, Constantinescu, I; Boscaiu, V; Cianga, P; Dinu, AA; Gai, E; Melinte, M; Moise, A, Immunogenetics, 2016 Mar., Vol.68, Issue 3
TOP